Разработка технологии получения рекомбинантных белков человека

Разработаны генетические конструкции для обеспечения продукции рекомбинантного лактоферрина человека с молоком генетически модифицированных животных, проведён эксперимент по исследованию эффективности генетических конструкций и качеству рекомбинантного белка на лабораторных животных (1). Разработана высокоэффективная мультиплексная ПЦР тест-система для идентификации трансгена и его целостности (21). Показана высокая эффективность конструкций, содержащих 1-3 интроны гена лактоферрина в составе конструкции. Показано, что новые терминаторы транскрипции достоверно увеличивают уровень экспрессии целевого белка при случайном встраивании конструкции (23) Показано высокое качество рекомбинантного белка и его соответствие природному по физико-химическим свойствам. Показано отсутствие влияния трансгена на здоровье и репродуктивную способность генетически-модифицированных мышей в ряду 12 поколений, стабильность трансгена и сохранение уровня продукции рекомбинантного белка в поколениях. Проведён эксперимент по получению рекомбинантного лактоферрина человека из молока генетически модифицированных сельскохозяйственных животных (4). Получены 2 линии коз, содержащие разные генетические конструкции, характеризующиеся разным уровнем продукции рекомбинантного лактоферрина человека в молоке. Разработана опытно-промышленная технология получения высокочистого рекомбинантного лактоферрина человека из молока трансгенных коз. Показана его высокая биологическая активность и синергетический эффект при использовании совместно с антибиотиками (37). Показано повышение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам в присутствии лактоферрина. Проведен анализ нормативно-правовой базы использования трансгенных организмов для производства лекарств и продуктов питания в России и в мире, сделан вывод о необходимости гармонизации российского законодательства (29). Рассмотрены философские основы нового технологического уклада, сделан вывод о необходимости рассмотрения проблем трансгенеза как мировозренческого конфликта в эпоху трансформации понимания человека и окружающей среды (39). Проведён анализ практик медицинского применения лактоферрина человека в медицине и особенно в педиатрии, сделан вывод о недостаточности данных о влиянии связанного железа в составе лактоферрина на баланс железа в организме недоношенного новорожденного. Используемые в медицинской практике дозировки должны учитывать влияние лактоферрина на метаболизм железа. (36). Проведён анализ современных подходов к созданию конструкций для трансгенеза, дана оценка эффективности различных регуляторных элементов, рассмотрены основные направления развития технологии в мире (5). Проведён сравнительный анализ технологий встраивания трансгена, показаны перспективность сочетания технологии генного редактирования и трансгенеза для повышения эффективности генной инженерии животных для создания продуцентов рекомбинантных белков (15). Показана приоритетность применения современных технологий производства лекарств и продуктов питания. Анализ технологии создания трансгенных животных показал необходимость внесения изменений в общепринятый протокол трансплантации микроинъецированных зигот животным реципиентам и снижения их количества до физиологической нормы (до 6 на мыши и не более 1 на козу) вместо рекомендованных 60 на мышь и 6 на козу. Такой подход повышает выход жизнеспособных первичных трансгенных животных и снижает нецелевой расход микроинъецированных зигот (28).

скачать (1) ENG

скачать (1) РУС

скачать (4)

скачать (5) ENG

скачать (5) РУС

скачать (15) ENG

скачать (15) РУС

скачать (21)

скачать (23)

скачать (28) ENG

скачать (28) РУС

скачать (29)

скачать (36)

скачать (37)

скачать (39)

Показана возможность получения биологически активной проурокиназы человека за счёт коэкспрессии в молоке проурокиназы и бактериального ингибитора сериновых протеаз – экотина. Таким образом проурокиназа не гидролизуется протеазами в молоке до урокиназы, а выделяется в билогически активной форме. В ходе экспериментов показана высокая токсичность трансгена экотина для трансгенных животных, сделан вывод о нецелесообразности масштабирования экспериментов на сельскохозяйственных животных.

скачать (2)

Получены генетически модифицированные животные, продуцирующие с молоком рекомбинантный белок теплового шока HSP-70 человека. Показана необходимость оптимизации аминокислотной последовательности этого белка, поскольку профиль гликозилирования в молочной железе и в других тканях различаются, это приводило к гликозилированию по сайтам, которые не модифицируются при внутриклеточной экспрессии, что приводило к продукции биологически не активного белка. Показано, что аминокислотная оптимизация позволяет получать биологически активный белок в молоке. В связи с возникновением новых эпитопов оптимизированный рекомбинантный белок обладает повышенным аллергическим потенциалом и при разработке технологии производства лекарств на его основе этот параметр должен дополнительно контролироваться.

скачать (11)


Разработка технологии моделирования заболеваний человека

Представлен обзор современных методов моделирования заболеваний человека на генетически модифицированных животных. Сделан вывод о необходимости проведения более масштабных исследований по моделированию заболеваний человека для фундаментальных исследований и клинических испытаний. При этом наиболее перспективным представляется подход, сочетающий в себе преимущества трансгенеза и генного редактирования для высокоэффективного сайт-специфичного встраивания сложных генетических конструкций.

скачать (13)

Предложена конструкция, содержащая аберрантную форму белка FUS человека под контролем паннейронального промотора Thy1, на культуре ткани показана высокая агрегационная способность такого варианта белка. Получены трансгенные мыши, суперэкспрессирующие аберрантную форму белка FUS (7). Показано развитие у трансгенных мышей нейро-мышечного расстройства по типу бокового амиотрофического склероза. У мышей спонтанно в 100% случаев развивается паралич сначала задних конечностей. Средняя продолжительность жизни мышей составила 124 дня (дикие контрольные мыши живут до 750 дней) (8). Агрегаты рекомбинантного белка человека обнаружены в боковых мотонейронах и включают в себя также нативный белок мыши. Линия мышей откликается на терапию гама-карболином, впервые показано, что соединения этого ряда могут быть использованы для терапии нейродегенерации на фоне специфической деградации боковых мотонейронов (10), применение лекарственного препарата Димебон реперзентативно продлевает пресимптоматическую стадию заболевания у трансгенных мышей, не оказывая влияния на динамику заболевания и скорость перехода его в терминальную стадию (12). Обобщение результатов исследований во многих научных центрах, в том числе с использованием разработанной модели нейродегенерации, позволяет отнести отечественный препарат Димебон и его производные к группе перспективных соединений, на основе которых могут создаваться новые соединения этого ряда с улучшенными показателями фармакокинетики и эффективности действия и которые могут быть использованы в составе комплексной патогенетической терапии социально значимых нейродегенеративных болезней (16).

скачать (7)

скачать (8)

скачать (10) ENG

скачать (10) РУС

скачать (12)

скачать (16) ENG

скачать (16) РУС

В результате случайной хромосомной транслокации трансгена получена новая линия трансгенных мышей с изменённым профилем экспрессии аберрантной формы белка FUS человека (26). Продолжительность жизни мышей резко возросла по сравнению с базовой линией, белковые агрегаты образуются в нейронах коры головного мозга, мыши показывают симптомы фронтотемпоральной лобной дегенерации. Полученная линия валидирована как модель когнитивных расстройств нейродегенерации (30). Обнаружено существенное изменение в транскриптоме спинного мозга этих мышей по сравнению с их пометами дикого типа. Мы предполагаем, что по крайней мере некоторые из этих изменений отражают активацию клеточных механизмов, компенсирующих потенциально повреждающее действие патогенной продукции FUS. Дальнейшие исследования этого механизма могут выявить эффективные мишени для терапии FUS-БАС и, возможно, других форм БАС (38).

скачать (26)

скачать (30)

скачать (38)

Предложен вариант конструкции с аберрантной формой белка FUS человека без РНК связывающего домена. Показаны высокая агрегационная способность этого варианта белка на культуре ткани. Получены трансгенные мыши, суперэкспрессирующие такую форму белка. Показано, что мышата, содержавшие трансген в гетерозиготе (1 копия на геном), показывают развитие лавинообразного нейродегенеративного процесса с первых дней жизни и умирают в возрасте 15-21 дня с тяжелым фенотипом, выражающимся в треморе конечностей, головы, хвоста. Сделан вывод о решающем влиянии нарушения связывания с РНК на развитие FUS-протеинопатии.

скачать (9)

Проведён анализ мутации в гене дистрофина конкретного пациента, оценено её популяционное распространение (34), проведён эксперимент по разработке системы для генного редактирования и созданию персонализированной модели. Разработан новый протокол выделения ДНК из бластоцист, который позволяет наработать достаточное количество материала для анализа секвенированием по Сэнгеру до 20 точек потенциального неспецифичного CRISPR/Cas9 разрезания генома. Получены мыши, несущие в геноме делецию соответствующую мутации у пациента – 400 тыс. пар нуклеотидов. Мыши валидированы как модель дистрофии Дюшенна, показано развитие хронического воспаления мышечной ткани, рубцевание, увеличение времени релаксации мышц и снижение мышечной силы (19). Показано что применение терапии на основе модифицированных олигонуклеотидов – экзонскипинг не приводит к образованию правильного белка. Показано, что с помощью аденоассоциированных вирусов в мышцы эффективно доставляется миниген дистрофина, что приводит к снижению выраженности симптомов заболевания.

скачать (19)

скачать (33) ENG

скачать (33) РУС

скачать (34) ENG

скачать (34) РУС

Созданы мыши, суперэкспрессирующие альфа и бета цепи аутоимунного Т-клеточного рецептора. Показано, что у трансгенных мышей значительно изменено разнообразие вариантов Т-клеточных рецепторов, при этом количество аутореактивных Т-клеток в популяции достигает 93%. На модели трансгенных мышей показан феномен фенотипического аллельного исключения, в случае альфа цепи рецептора и полный запрет на реаранжировку бета-цепи. Полученные мыши служат удобной моделью для изучения различных процессов, лежащих в основе Т-клеточного ответа, процесса формирования специфичности Т-лимфоцитов к сингенным и аллогенным пептидам в комплексе с МНС. На разработанной модели впервые показано, что размеры пулов Т-лимфоцитов с различным поверхностным активационным фенотипом зависят от структуры Т-клеточных рецепторов.

скачать (3) ENG

скачать (3) РУС

скачать (6) ENG

скачать (6) РУС

Созданы трансгенные мыши, несущие в геноме трансген альфа-цепи Т-клеточного рецептора, специфичного к антигену H-2Kb клеток лимфомы EL-4. Показано, что эти трансгенные мыши отторгали опухолевые клетки EL-4, несущие аллоантиген H-2Kb более эффективно, чем мыши дикого типа и аналогично мышам с трансплантированными опухоль-специфическими Т-клетками памяти. Показано, что альфа-цепи играют ключевую роль в функционировании Т-клеточного иммунного ответа и перспективным представляется подход по определению доминантных альфа-цепей для повышения иммунного ответа в том числе в противоопухолевой терапии.

скачать (24)

Для моделирования болезней, связанных с повышенной экспрессией интерлейкина-6 человека, были созданы трансгенные мыши с возможностью индуцированной активации экспрессии трансгена ИЛ-6. Активация экспрессии во время эмбрионального развития приводила к ранней постнатальной гибели мышат на фоне нарушения гемопоэза. Активация во взрослом возрасте воспроизводила фенотип хронического воспаления и, хотя и проводила к снижению продолжительности жизни животных, позволяет исследовать на них варианты противовоспалительной терапии.

скачать (17) ENG

скачать (17) РУС

Для исследования противораковых свойств ингибитора циклинзависимой протеинкиназы CDK8 методом генного редактирования созданы мыши, несущие мутацию, приводящую к аминокислотной замене F97G. Первичные трансгены несут мутацию в мозаичном состоянии, потомки F1 погибают внутриутробно или первичные трансгены не размножаются. Эксперимент показал, что симптоматика генетического дефекта в гене CDK8 у мыши соответствует и даже превосходит таковую у человека. Сделан вывод о необходимости создания модели на основе индуцируемого во взрослом состоянии нокаута.

скачать (27)

Проведён анализ мутации пациента с синдромом Леши-Нихена, разработана система для генного редактирования и созданы генетически модифицированные мыши, несущие мутацию, соответствующую мутации пациента. Ведутся работы по анализу полученной линии мышей и формированию экспериментальных групп для исследования влияния нейропротекторных препаратов на патогенез этого заболевания.

скачать (32)

Проведён обширный обзор существующих моделей атеросклероза. Проанализированы преимущества и недостатки используемых животных моделей. Сделан вывод о их ограниченной применимости ввиду отсутствия выраженного атерогенеза. Предложены варианты развития технологии моделирования атеросклероза – создание мышей с индуцируемыми и конститутивными мутациями в митохондриальном геноме, мышей с индуцируемой сиалидазной активностью в крови. Ожидается что такого рода нарушения индуцируют атерогенез и в большей мере соответствуют патогенезу заболевания у человека.

скачать (18)

скачать (25)

Проведён обзор существующих моделей дистонии и болезни Хантингтона. Рассмотрены различные варианты использования моделей на основе плодовой мушки, круглых червей, грызунов, приматов. Сделан вывод о необходимости совершенствования генетических моделей для более полного соответствия патогенезу заболевания человека.

скачать (20)

Проведён анализ литературы о полиморфизме факторов, индуцируемых гипоксией, при различных патологиях. Показана тесная взаимосвязь полиморфизма генов системы HIF с широким спектром сердечно-сосудистых, воспалительных и онкологических заболеваний. Изучение системы HIF может способствовать открытию новых мишеней и методов фармакологического воздействия для лечения сердечно-сосудистой, онкологической, ревматологической и эндокринологической патологии. Разработана система редактирования генома для создания мышей с индуцируемым нокаутом генов системы ответа на гипоксию. Ведутся работы по созданию генетически модифицированных моделей.

скачать (31)

Недавние исследования показали, что грудное молоко содержит популяцию клеток, проявляющих многие свойства, характерные для стволовых клеток. В обзоре излагается прогресс, достигнутый в этой недавно появившейся области биологии стволовых клеток, и приводится анализ имеющихся данных по очистке, размножению и дифференцировке определенных типов клеток-предшественников из грудного молока. Обсуждаются также возможные пути развития клеток грудного молока, включая микрохимеризм, вызванный их передачей в различные органы младенца. Уникальные свойства стволовых клеток, полученных из грудного молока, такие как их необычно низкий опухолевый потенциал и незначительная способность образовывать тератомы, выделяются как очевидные преимущества использования этих клеток в регенеративной терапии. Проводятся по исследованию возможной роли стволовых клеток молока в развитии модельных патологий – FUS-нейродегенерация (на мышах) и синдром Ретта (клиническое исследование)

скачать (22)

Получены антитела к новой изоформе белка – секрутина, вовлечённого в процессы ангиогенеза при различных типах канцерогенеза. Показано, что короткая изоформа этого белка, в отличие от полноразмерного белка, не способна активировать промотор MYC – проонкогенного транскрипционного фактора. Секрутин является потенциальной мишенью для кондиционного нокаута и, возможно, мишенью для противораковых препаратов.

скачать (14)


Список публикаций

СсылкаQ-Scopus
1Дейкин А.В., Ермолкевич Т.Г., Гурский Я.Г., Краснов А.Н., Георгиева С.Г., Кузнецов С.Л., Деревянко В.Г., Новикова Н.И., Мурашев А.Н., Гольдман И.Л., Садчикова Е.Р. СОСТОЯНИЕ ЗДОРОВЬЯ И ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНАЯ СПОСОБНОСТЬ ТРАНСГЕННЫХ МЫШЕЙ, ПРОДУЦИРУЮЩИХ С МОЛОКОМ РЕКОМБИНАНТНЫЙ БЕЛОК ЧЕЛОВЕКА ЛАКТОФЕРРИН Доклады Академии наук. 2009. Т. 427. № 4. С. 545-548.
Deykin AV, Ermolkevich TG, Gursky YG, Krasnov AN, Georgieva SG, Kuznetsov SL, Derevyanko VG, Novikova NI, Murashev AN, Goldman IL, Sadchikova ER. The state of health and the reproductive potential of transgenic mice secreting recombinant human lactoferrin in milk. Dokl Biochem Biophys. 2009 Jul-Aug;427:195-8. doi: 10.1134/s1607672909040073. PubMed PMID: 19817135.
3
2Gursky Y, Bibilashvili R, Minashkin M, Krasnov A, Deikin A, Ermolkevich T, Popov A, Verbovaya L, Rutkevich N, Shevelev A, Georgieva S, Razin SV, Goldman I, Sadchikova E. Expression of full-length human pro-urokinase in mammary glands of transgenic mice. Transgenic Res. 2009 Oct;18(5):747-56. doi: 10.1007/s11248-009-9269-9. Epub 2009 Apr 25. PubMed PMID: 19396561.1
3Звездова Е.С., Силаева Ю.Ю., Вагида М.С., Марюхнич Е.В., Дейкин А.В., Ермолкевич Т.Г., Кадулин С.Г., Садчикова Е.Р., Гольдман И.Л., Казанский Д.Б. СОЗДАНИЕ ТРАНСГЕННЫХ ЖИВОТНЫХ, СИНТЕЗИРУЮЩИХ альфа - И бета -ЦЕПИ АУТОРЕАКТИВНОГО T-КЛЕТОЧНОГО РЕЦЕПТОРА Молекулярная биология. 2010. Т. 44. № 2. С. 311-322.
Zvezdova ES, Silaeva IuIu, Vagida MS, Mariukhnich EV, Deĭkin AV, Ermolkevich TG, Kadulin SG, Sadchikova ER, Gol'dman IL, Kazanskiĭ DB. [Generation of transgenic animals, expressing alpha- and beta-chains of autoreactive TCR]. Mol Biol (Mosk). 2010 Mar-Apr;44(2):311-22. PubMed PMID: 20586192.
3
4Goldman IL, Georgieva SG, Gurskiy YG, Krasnov AN, Deykin AV, Popov AN, Ermolkevich TG, Budzevich AI, Chernousov AD, Sadchikova ER. Production of human lactoferrin in animal milk. Biochem Cell Biol. 2012 Jun;90(3):513-9. doi: 10.1139/o11-088. Epub 2012 Feb 23. PubMed PMID: 22360490.2 (1)
5Максименко О.Г., Дейкин А.В., Ходарович Ю.М., Георгиев П.Г. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТРАНСГЕННЫХ ЖИВОТНЫХ В БИОТЕХНОЛОГИИ: ПЕРСПЕКТИВЫ И ПРОБЛЕМЫ Acta Naturae (русскоязычная версия). 2013. Т. 5. № 1 (16). С. 33-47.
Maksimenko OG, Deykin AV, Khodarovich YM, Georgiev PG. Use of transgenic animals in biotechnology: prospects and problems. Acta Naturae. 2013 Jan;5(1):33-46. PubMed PMID: 23556129; PubMed Central PMCID: PMC3612824.
2
6Силаева Ю.Ю., Калинина А.А., Вагида М.С., Хромых Л.М., Дейкин А.В., Ермолкевич Т.Г., Садчикова Е.Р., Гольдман И.Л., Казанский Д.Б. СОКРАЩЕНИЕ ПУЛА Т-ЛИМФОЦИТОВ С ПОВЕРХНОСТНЫМ ФЕНОТИПОМ ЭФФЕКТОРОВ И КЛЕТОК ПАМЯТИ ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕМ ЭКСПРЕССИИ ТРАНСГЕНА бета-ЦЕПИ Т-КЛЕТОЧНОГО РЕЦЕПТОРА Биохимия. 2013. Т. 78. № 5. С. 714-726.
Silaeva YY, Kalinina AA, Vagida MS, Khromykh LM, Deikin AV, Ermolkevich TG, Sadchikova ER, Goldman IL, Kazansky DB. Decrease in pool of T lymphocytes with surface phenotypes of effector and central memory cells under influence of TCR transgenic β-chain expression. Biochemistry (Mosc). 2013 May;78(5):549-59. doi: 10.1134/S0006297913050143. PubMed PMID: 23848158.
2
7Shelkovnikova TA, Peters OM, Deykin AV, Connor-Robson N, Robinson H, Ustyugov AA, Bachurin SO, Ermolkevich TG, Goldman IL, Sadchikova ER, Kovrazhkina EA, Skvortsova VI, Ling SC, Da Cruz S, Parone PA, Buchman VL, Ninkina NN. Fused in sarcoma (FUS) protein lacking nuclear localization signal (NLS) and major RNA binding motifs triggers proteinopathy and severe motor phenotype in transgenic mice. J Biol Chem. 2013 Aug 30;288(35):25266-74. doi: 10.1074/jbc.M113.492017. Epub 2013 Jul 18. PubMed PMID: 23867462; PubMed Central PMCID: PMC3757190.1
8Дейкин А.В., Ковражкина Е.А., Овчинников Р.К., Броновицкий Е.В., Разинская О.Д., Смирнов А.П., Ермолкевич Т.Г., Еляков А.Б., Попов А.Н., Федоров Е.Н., Лыткина О.А., Кухарский М.С., Тарасова Т.В., Шелковникова Т.А., Устюгов А.А., Нинкина Н.Н., Гольдман И.Л., Садчикова Е.Р., Бачурин С.О., Скворцова В.И. МОДЕЛЬ БОКОВОГО АМИОТРОФИЧЕСКОГО СКЛЕРОЗА НА ОСНОВЕ ЛИНИИ ТРАНСГЕННЫХ МЫШЕЙ, ЭКСПРЕССИРУЮЩИХ МУТАНТНУЮ ФОРМУ FUS БЕЛКА ЧЕЛОВЕКА. Журнал неврологии и психиатрии им. C.C. Корсакова. 2014. Т. 114. № 8. С. 62-69
Deĭkin AV, Kovrazhkina EA, Ovchinnikov RK, Bronovitskiĭ EV, Razinskaia OD, Smirnov AP, Ermolkevich TG, Eliakov AB, Popov AN, Fedorov EN, Lytkina OA, Kukharskiĭ MS, Tarasova TV, Shelkovnikova TA, Ustiugov AA, Ninkina NN, Gol'dman IL, Sadchikova ER, Bachurin SO, Skvortsova VI. [A mice model of amyotrophic lateral sclerosis expressing mutant human FUS protein]. Zh Nevrol Psikhiatr Im S S Korsakova. 2014;114(8):62-9. PubMed PMID: 25345633.
4
9Robinson HK, Deykin AV, Bronovitsky EV, Ovchinnikov RK, Ustyugov AA, Shelkovnikova TA, Kukharsky MS, Ermolkevich TG, Goldman IL, Sadchikova ER, Kovrazhkina EA, Bachurin SO, Buchman VL, Ninkina NN. Early lethality and neuronal proteinopathy in mice expressing cytoplasm-targeted FUS that lacks the RNA recognition motif. Amyotroph Lateral Scler Frontotemporal Degener. 2015;16(5-6):402-9. doi: 10.3109/21678421.2015.1040994. Epub 2015 May 20. PubMed PMID: 25991062; PubMed Central PMCID: PMC4811325.1
10Броновицкий Е.В., Дейкин А.В., Ермолкевич Т.Г., Еляков А.Б., Фёдоров Е.Н., Садчикова Е.Р., Гольдман И.Л., Овчинников Р.К., Роман А.Ю., Хританкова И.В., Кухарский М.С., Бухман В.Л., Бачурин С.О., Устюгов А.А. ПОДАВЛЕНИЕ ГАММА-КАРБОЛИНОМ НЕЙРОДЕГЕНЕРАТИВНОГО ПРОЦЕССА В УСЛОВИЯХ ТРАНСГЕННОЙ МОДЕЛИ БОКОВОГО АМИОТРОФИЧЕСКОГО СКЛЕРОЗА. Доклады Академии наук. 2015. Т. 462. № 5. С. 609.
Bronovitsky EV, Deikin AV, Ermolkevich TG, Elyakov AB, Fedorov EN, Sadchikova ER, Goldman IL, Ovchinnikov RK, Roman AY, Khritankova IV, Kukharsky MS, Buchman VL, Bachurin SO, Ustyugov AA. Gamma-carboline inhibits neurodegenerative processes in a transgenic model of amyotrophic lateral sclerosis. Dokl Biochem Biophys. 2015;462:189-92. doi: 10.1134/S1607672915030138. Epub 2015 Jul 12. PubMed PMID: 26163217.
3
11Gurskiy YG, Garbuz DG, Soshnikova NV, Krasnov AN, Deikin A, Lazarev VF, Sverchinskyi D, Margulis BA, Zatsepina OG, Karpov VL, Belzhelarskaya SN, Feoktistova E, Georgieva SG, Evgen'ev MB. The development of modified human Hsp70 (HSPA1A) and its production in the milk of transgenic mice. Cell Stress Chaperones. 2016 Nov;21(6):1055-1064. doi: 10.1007/s12192-016-0729-x. Epub 2016 Aug 10. PubMed PMID: 27511022; PubMed Central PMCID: PMC5083674.2
12Мальцев А.В., Дейкин А.В., Овчинников Р.К., Чичева М.М., Ковражкина Е.А., Разинская О.Д., Броновицкий Е.В., Будевич А.И., Кирикович Ю.К., Бачурин С.О., Устюгов А.А., Скворцова В.И. ОТСРОЧЕННЫЙ ДЕБЮТ СИМПТОМАТИЧЕСКОЙ СТАДИИ FUS-ПРОТЕИНОПАТИИ У ТРАНСГЕННЫХ МЫШЕЙ ПОД ДЕЙСТВИЕМ ДИМЕБОНА Журнал неврологии и психиатрии им. C.C. Корсакова. 2017. Т. 117. № 4. С. 64-67.
Maltsev AV, Deykin AV, Ovchinnikov RK, Chicheva MM, Kovrazhkina EA, Razinskaya OD, Bronovitsky EV, Budevich AI, Kirikovich YK, Bachurin SO, Ustyugov AA, Skvortsova VI. [Dimebon delays the onset of symptoms of FUS-proteinopathy in transgenic mice]. Zh Nevrol Psikhiatr Im S S Korsakova. 2017;117(4):64-67. doi: 10.17116/jnevro20171174164-67. PubMed PMID: 28617382.
4
13Glanz VY, Orekhov AN, Deykin AV. Human Disease Modelling Techniques: Current Progress. Curr Mol Med. 2018;18(10):655-660. doi: 10.2174/1566524019666190206204357. Review. PubMed PMID: 30727892.1
14Демин Д.Э., Боголюбова А.В., Зленко Д.В., Уварова А.Н., Дейкин А.В., Путляева Л.В., Белоусов П.В., Митькин Н.А., Корнеев К.В., Свиряева Е.Н., Кулаковский И.В., Татосян К.А., Купраш Д.В., Шварц А.М. НОВАЯ КОРОТКАЯ ФОРМА СЕКУРИНА СТИМУЛИРУЕТ ЭКСПРЕССИЮ ЦИКЛИНА D3 И АНГИОГЕННЫХ ФАКТОРОВ VEGFA И FGF2, НО НЕ ВЛИЯЕТ НА ЭКСПРЕССИЮ ТРАНСКРИПЦИОННОГО ФАКТОРА MYC. Молекулярная биология. 2018. Т. 52. № 3. С. 508-518.
Demin DE, Bogolyubova AV, Zlenko DV, Uvarova AN, Deikin AV, Putlyaeva LV, Belousov PV, Mitkin NA, Korneev KV, Sviryaeva EN, Kulakovskiy IV, Tatosyan KA, Kuprash DV, Schwartz AM. [The Novel Short Isoform of Securin Stimulates the Expression of Cyclin D3 and Angiogenesis Factors VEGFA and FGF2, but Does Not Affect the Expression of MYC Transcription Factor]. Mol Biol (Mosk). 2018 May-Jun;52(3):508-518. doi: 10.7868/S002689841803014X. PubMed PMID: 29989583.
3
15Шепелев М.В., Калиниченко С.В., Дейкин А.В., Коробко И.В. ПОЛУЧЕНИЕ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ ИЗ МОЛОКА ТРАНСГЕННЫХ ЖИВОТНЫХ: СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ. Acta Naturae (русскоязычная версия). 2018. Т. 10. № 3 (38). С. 42-50.
Shepelev MV, Kalinichenko SV, Deykin AV, Korobko IV. Production of Recombinant Proteins in the Milk of Transgenic Animals: Current State and Prospects. Acta Naturae. 2018 Jul-Sep;10(3):40-47. PubMed PMID: 30397525; PubMed Central PMCID: PMC6209402.
2
16Скворцова В.И., Бачурин С.О., Устюгов А.А., Кухарский М.С., Дейкин А.В., Бухман В.Л., Нинкина Н.Н. ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ГАММА-КАРБОЛИНОВ ДЛЯ РАЗРАБОТКИ ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ ПРОТЕИНОПАТИЙ. Acta Naturae (русскоязычная версия). 2018. Т. 10. № 4 (39). С. 59-62.
Skvortsova VI, Bachurin SO, Ustyugov AA, Kukharsky MS, Deikin AV, Buchman VL, Ninkina NN. Gamma-Carbolines Derivatives As Promising Agents for the Development of Pathogenic Therapy for Proteinopathy. Acta Naturae. 2018 Oct-Dec;10(4):59-62. PubMed PMID: 30713762; PubMed Central PMCID: PMC6351039.
2
17Зварцев Р., Коршунова Д., Горшкова Е., Носенко М., Корнеев К., Максименко О., Коробко И., Купраш Д., Друцкая М., Недоспасов С.А., Дейкин А. НЕОНАТАЛЬНАЯ СМЕРТНОСТЬ И ВОСПАЛИТЕЛЬНЫЙ ФЕНОТИП У НОВЫХ ТРАНСГЕННЫХ МЫШЕЙ СО СВЕРХЭКСПРЕССИЕЙ ИНТЕРЛЕЙКИНА-6 ЧЕЛОВЕКА В МИЕЛОИДНЫХ КЛЕТКАХ Доклады Академии наук. 2018. Т. 483. № 4. С. 460-463.
Zvartsev RV, Korshunova DS, Gorshkova EA, Nosenko MA, Korneev KV, Maksimenko OG, Korobko IV, Kuprash DV, Drutskaya MS, Nedospasov SA, Deikin AV. Neonatal Lethality and Inflammatory Phenotype of the New Transgenic Mice with Overexpression of Human Interleukin-6 in Myeloid Cells. Dokl Biochem Biophys. 2018 Nov;483(1):344-347. doi: 10.1134/S1607672918060157. Epub 2019 Jan 3. PubMed PMID: 30607736.
3
18Volobueva AS, Orekhov AN, Deykin AV. An update on the tools for creating transgenic animal models of human diseases - focus on atherosclerosis. Braz J Med Biol Res. 2019;52(5):e8108. doi: 10.1590/1414-431X20198108. Epub 2019 Apr 25. Review. PubMed PMID: 31038578; PubMed Central PMCID: PMC6487744.1
19Egorova TV, Zotova ED, Reshetov DA, Polikarpova AV, Vassilieva SG, Vlodavets DV, Gavrilov AA, Ulianov SV, Buchman VL, Deykin AV. CRISPR/Cas9-generated mouse model of Duchenne muscular dystrophy recapitulating a newly identified large 430 kb deletion in the human DMD gene. Dis Model Mech. 2019 Apr 25;12(4). doi: 10.1242/dmm.037655. PubMed PMID: 31028078; PubMed Central PMCID: PMC6505476.1
20Zhunina OA, Yabbarov NG, Orekhov AN, Deykin AV. Modern approaches for modelling dystonia and Huntington's disease in vitro and in vivo. Int J Exp Pathol. 2019 Apr;100(2):64-71. doi: 10.1111/iep.12320. Epub 2019 May 15. Review. PubMed PMID: 31090117; PubMed Central PMCID: PMC6540672.3
21Калмыков В.А., Кусов П.А., Дейкин А.В. РАЗРАБОТКА МУЛЬТИПЛЕКСНОЙ ПЦР-ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРАНСГЕНА НА ОСНОВЕ ВЕКТОРА ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ В МОЛОКЕ PBC1 И ЕГО ПРОИЗВОДНЫХ НА ГЕНЕТИЧЕСКОМ ФОНЕ MUS MUSCULUS Доклады Академии наук. 2019. Т. 485. № 6. С. 750-753.
Kalmykov VA, Kusov PA, Deykin AV. Development of a Multiplex PCR Test System for the Determination of a Transgene Based on the pBC1 Plasmid and Its Derivatives for the Expression of Recombinant Proteins in Mus musculus Milk. Dokl Biochem Biophys. 2019 Mar;485(1):153-156. doi: 10.1134/S1607672919020212. Epub 2019 Jun 14. PubMed PMID: 31201639.
3
22Ninkina N, Kukharsky MS, Hewitt MV, Lysikova EA, Skuratovska LN, Deykin AV, Buchman VL. Stem cells in human breast milk. Hum Cell. 2019 Jul;32(3):223-230. doi: 10.1007/s13577-019-00251-7. Epub 2019 Apr 10. Review. PubMed PMID: 30972555; PubMed Central PMCID: PMC6570695.2
23Deykin A, Tikhonov M, Kalmykov V, Korobko I, Georgiev P, Maksimenko O. Transcription termination sequences support the expression of transgene product secreted with milk. Transgenic Res. 2019 Aug;28(3-4):401-410. doi: 10.1007/s11248-019-00122-9. Epub 2019 Mar 28. PubMed PMID: 30919251.1
24Zamkova M, Kalinina A, Silaeva Y, Persiyantseva N, Bruter A, Deikin A, Khromykh L, Kazansky D. Dominant role of the α-chain in rejection of tumor cells bearing a specific alloantigen in TCRα transgenic mice and in in vitro experiments. Oncotarget. 2019 Aug 6;10(47):4808-4821. doi: 10.18632/oncotarget.27093. eCollection 2019 Aug 6. PubMed PMID: 31448049; PubMed Central PMCID: PMC6690675.1
25Mushenkova NV, Summerhill VI, Silaeva YY, Deykin AV, Orekhov AN. Modelling of atherosclerosis in genetically modified animals. Am J Transl Res. 2019;11(8):4614-4633. eCollection 2019. Review. PubMed PMID: 31497187; PubMed Central PMCID: PMC6731422.1
26Lysikova EA, Kukharsky MS, Chaprov KD, Vasilieva NA, Roman AY, Ovchinnikov RK, Deykin AV, Ninkina N, Buchman VL. Behavioural impairments in mice of a novel FUS transgenic line recapitulate features of frontotemporal lobar degeneration. Genes Brain Behav. 2019 Nov;18(8):e12607. doi: 10.1111/gbb.12607. Epub 2019 Sep 10. PubMed PMID: 31437340.1
27Силаева Ю.Ю., Калмыков В.А., Варламова Е.А., Коршунов Е.Н., Коршунова Д.С., Кубекина М.В., Штиль А.А., Ронинсон И., Дейкин А.В. редактирование генома как подход к исследованию перепрограммирования транскрипции in vivo. Доклады Российской академии наук. Науки о жизни. 2020. Т. 490. № 1. С. 55-58.-
28Silaeva Y, Kirikovich Y, Skuratovskaya L, Deikin A. Optimal Number of Embryos for Transplantation in Obtaining Genetic-Modified Mice and Goats. Russian Journal of Developmental Biology. 2019-2-; 49(6):356-361. doi: 10.1134/S106236041806005X.-
29Дейкин А.В., Кузнецова В.Н., Кирикович Ю.К., Коваленко Д.В., Солдатов В.О. ГМО регулирование: Белоруссия, БРИКС, ЕС, США. Азимут научных исследований: экономика и управление. 2019. Т. 8. № 4 (29). С. 141-145.-
30Лысикова Е.А., Чапров К.Д., Иванова Т.А., Устюгов А.А., Овчинников Р.К., Кухарский М.С., Коршунов Е.Н., Дейкин А.В., Бачурин С.О., Нинкина Н.Н. НАРУШЕНИЕ КОГНИТИВНОЙ ФУНКЦИИ У ТРАНСГЕННЫХ МЫШЕЙ СО СНИЖЕННЫМ УРОВНЕМ ЭКСПРЕССИИ ПАТОГЕННОЙ ФОРМЫ БЕЛКА FUS ЧЕЛОВЕКА. Патогенез. 2019. Т. 17. № 1. С. 41-49.
Lysikovа EL, Chaprov KD, Ivanova TA, Ustyugov АA, Ovchinnikov RK, Kucharsky MS, Korshunov EA, Deikin AV, Bachurin SO, Ninkina NN. [Transgenic mice with decreased level of the pathogenic form of human FUS protein display cognitive impairment]. Patogenez [Pathogenesis]. 2019; 17(1):41-49. doi: 10.25557/2310-0435.2019.01.41-49.
-
31Soldatova V.A., Demidenko A.N., Soldatov V.O., Deikin A.V., Bushueva O.Y., Puchenkova O.A. Hypoxia-inducible factor: Basic biology and involvement in cardiovascular pathology. Asian Journal of Pharmaceutics. 2018. Т. 12. № 4. С. S1173-S1178.3
32Kalmykov V, Kusov P, Yablonskaia M, Korshunov E, Korshunova D, Kubekina M, Silaeva Y, Deykin A, Lukyanov N. New personalized genetic mouse model of Lesch-Nyhan syndrome for pharmacology and gene therapy. Research Results in Pharmacology. 2018 December; 4(4):115-122. doi: 10.3897/rrpharmacology.4.32209.-
33Dimitireva T, Reshetov D, Zhernovkov V, Vlodavets D, Zotova E, Ermolkevich T, Deykin A. Modification of the method for analysis of genome editing results using CRISPR/Cas9 system on preimplantation mouse embryos. Bulletin of Russian State Medical University. 2016; (3):15-20. doi: 10.24075/brsmu.2016-03-02.4
34Zotova E, Reshetov D, Zhernovkov V, Vlodavets D, Dimitrieva T, Deykin A. Analysis of phenotype expressions of deletions in the dystrophin gene in terms of efficiency of exon skipping as a method for treatment of hereditary dystrophinopathies. Bulletin of Russian State Medical University. 2016; (3):21-26. doi: 10.24075/brsmu.2016-03-03.4
35Deykin A, Selionova M, Krivoruchko A, Kovalenko D, Truhachev V. Genetic markers in sheep meat breeding. Vavilov Journal of Genetics and Breeding. 2016 January; 20(5):576-583. doi: 10.18699/VJ16.139.4
36Гудок А.А., Дейкин А.В. Лактоферрин - перспективы использования и анализ имеющихся результатов. Russian Scientist. 2017. Т. 1. № 1. С. 3-12.-
37Goldman IL, Deikin AV, Sadchikova ER. Human Lactoferrin Can Be Alternative to Antibiotics. Proceedings of the World Medical Conference. 2013:27−38.-
38Lysikova EA, Funikov S, Rezvykh AP, Chaprov KD, Kukharsky MS, Ustyugov A, Deykin AV, Flyamer IM, Boyle S, Bachurin SO, Ninkina N, Buchman VL. Low Level of Expression of C-Terminally Truncated Human FUS Causes Extensive Changes in the Spinal Cord Transcriptome of Asymptomatic Transgenic Mice. Neurochem Res. 2020 Mar 11;. doi: 10.1007/s11064-020-02999-z. [Epub ahead of print] PubMed PMID: 32157564.1
39Дейкин А.В., Саяхова А.Р. ТРАНСГЕНЕЗ. ФИЛОСОФСКИЕ ПОДХОДЫ И ТРАНСФОРМАЦИИ В книге: Науки о жизни и современная философия ответственный редактор Лисеев И.К.; Российская академия наук, Институт философии. Москва, 2010. С. 481-494.-